Para obter clones de DNA que correspondam, na sequência, à molécula de mRNA, uma molécula de cDNA é feita primeiro. Diferente dos clones genômicos, os clones de cDNA não têm sequências de
- A)CAP.
Errada, porque a cauda poli-A faz parte do mRNA maduro e costuma ser usada até para facilitar a síntese do cDNA.
- B)Exons.
Errada, porque os exons permanecem no mRNA maduro e, portanto, também aparecem no cDNA.
- C)Íntrons.
Certa, porque os íntrons são removidos do pré-mRNA no splicing e não entram no cDNA.
- D)Cauda poli-A.
Errada, porque a cauda poli-A está presente no mRNA maduro, embora não seja uma sequência codificante.
- E)Grupamento metil.
Errada, porque a metilação é uma modificação epigenética do DNA, não uma sequência que o cDNA deixe de ter por definição.
Gabarito: C
Quando a célula vai produzir um cDNA, ela parte do mRNA maduro, aquele RNA que já passou pelo processamento e ficou pronto para ser lido. Em laboratório, esse mRNA é convertido em DNA por ação da transcriptase reversa, formando uma cópia complementar que representa só a parte expressa do gene. A grande sacada aqui é: como o mRNA maduro já perdeu o que foi removido no splicing, o cDNA também vai refletir essa versão “enxuta” do gene. Por isso, ele corresponde à sequência transcrita e processada, sem carregar os trechos que não aparecem no RNA final. Já os clones genômicos são outra história: eles guardam o DNA como ele existe no genoma, com regiões codificantes e não codificantes. Então, se a questão pergunta o que os clones de cDNA não têm, a resposta é o material que foi retirado do pré-mRNA antes de virar mRNA maduro. Por isso o gabarito é a alternativa C. Em resumo: cDNA vem de mRNA maduro, então não traz os íntrons, que são justamente os trechos eliminados no processamento. É uma diferença clássica de genética molecular e cai muito em prova.