Sobre a técnica de RT-PCR, analise as afirmativas a seguir e assinale (V) para a verdadeira e (F) para a falsa. ( ) A técnica dispensa o uso de enzimas termo resistentes, pois é realizada à temperatura ambiente, sem a ocorrência de sequências de aquecimento/resfriamento no termociclador. ( ) É a técnica em que pequenas amostras de DNA podem ser rapidamente aumentadas em quantidades suficientes para que a análise seja feita. ( ) É utilizada para a identificação de vírus de RNA, sendo necessária a realização de uma reação inicial de transcrição reversa. As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente,
- A)F – V – F.
Errada, porque a terceira afirmativa é verdadeira e não falsa.
- B)F – V – V.
Certa, pois a primeira é falsa, a segunda é verdadeira no sentido da amplificação por PCR e a terceira é verdadeira.
- C)V – F – F.
Errada, porque a primeira afirmativa não é verdadeira e a segunda também não é falsa.
- D)V – V – F.
Errada, porque a primeira afirmativa não é verdadeira e a terceira não é falsa.
- E)F – F – V
Errada, porque a segunda afirmativa não é falsa.
Gabarito: B
A RT-PCR, na prática, mistura duas ideias: primeiro, a RNA é convertida em DNA complementar por uma enzima chamada transcriptase reversa; depois, esse material é amplificado por PCR. Por isso, ela é muito usada quando o alvo é um vírus de RNA, como muitos vírus respiratórios, porque a reação inicial transforma o RNA em uma forma que pode ser copiada e detectada com mais facilidade. A primeira afirmativa é falsa porque a técnica não dispensa enzimas termo resistentes nem acontece em temperatura ambiente. A PCR depende de ciclos de aquecimento e resfriamento, e a enzima precisa aguentar esse vai e vem sem “derreter” no processo. A segunda afirmativa também é falsa do jeito que foi escrita. Ela descreve a PCR em geral, mas a RT-PCR tem uma etapa a mais: primeiro vem a transcrição reversa do RNA para DNAc, e só depois a amplificação. Então a frase ficou incompleta e, por isso, incorreta no contexto da pergunta. A terceira afirmativa é verdadeira: a RT-PCR é usada para identificar vírus de RNA, justamente porque começa com uma reação de transcrição reversa. Assim, o conjunto das assertivas fica F - V - V, que corresponde ao gabarito B.