Sobre a técnica de ELISA, analise as afirmativas a seguir e assinale (V) para a verdadeira e (F) para a falsa. ( ) Em um ELISA competitivo, a amostra pode ser pré-incubada com um anticorpo conjugado a uma molécula de detecção e em seguida adicionado a poços previamente revestidos com um antígeno de referência. Neste caso a quantidade de antígeno presente na amostra será diretamente proporcional ao sinal observado. ( ) Em um método de ELISA direto o antígeno pode ser imobilizado na superfície da placa e detectado por um anticorpo específico conjugado a uma molécula de detecção. ( ) O método de ELISA indireto pode ser utilizado para detectar antígenos ou anticorpos específicos em uma amostra de soro, dependendo do objetivo e dos reagentes empregados. As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente,
- A)F – V – F.
Errada, porque a primeira afirmativa é falsa e a terceira também não é falsa.
- B)F – V – V.
Certa, porque a sequência correta é F - V - V.
- C)V – F – F.
Errada, porque a primeira afirmativa não é verdadeira e a segunda é verdadeira.
- D)V – V – F.
Errada, porque a primeira afirmativa não é verdadeira e a terceira não é falsa.
- E)V – V – V.
Errada, porque a primeira afirmativa é falsa e a terceira afirmativa é verdadeira.
Gabarito: B
O ELISA é uma técnica imunológica muito usada em laboratório para detectar e quantificar alvos, como antígenos ou anticorpos, com base na formação de complexo antígeno-anticorpo e geração de um sinal mensurável. A lógica geral é simples: quanto mais complexo se forma, mais forte tende a ser o sinal - mas isso muda no ELISA competitivo, onde acontece o contrário. No ELISA competitivo, o analito da amostra “disputa” ligação com um reagente marcado ou com sítios de ligação na placa. Por isso, quanto maior a quantidade de antígeno na amostra, menor costuma ser o sinal observado. Então a primeira afirmativa está errada ao dizer que a relação é diretamente proporcional. No ELISA direto, o antígeno fica preso na placa e é reconhecido por um anticorpo específico já conjugado a uma enzima ou outro marcador. Isso torna a segunda afirmativa correta. Já o ELISA indireto usa um reagente primário e outro secundário marcado, sendo muito empregado na detecção de anticorpos e, em arranjos diagnósticos específicos, também pode ser adaptado para detectar antígenos. Por isso a terceira afirmativa também é verdadeira. Assim, a sequência correta é F - V - V, que corresponde à alternativa B. Em provas, a banca gosta de inverter a lógica do competitivo e de confundir direto com indireto, então vale decorar a ideia central: no competitivo, mais analito gera menos sinal.