Sobre a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) e suas aplicações no diagnóstico de doenças virais, analise as afirmativas a seguir e assinale (V) para a verdadeira e (F) para a falsa. ( ) A técnica de PCR em tempo real triplex para HIV/HCV/HBV complementa a rotina de ensaios sorológicos, diminuindo o risco de falso negativo em função da janela imunológica. ( ) A técnica de PCR em tempo real permite quantificação relativa ou absoluta das amostras analisadas sendo útil na quantificação de carga viral. ( ) Para detecção de vírus cujo material genético é o RNA, como por exemplo o HBV, se faz necessário, em uma das etapas da técnica de PCR, a produção de cDNA através da enzima transcriptase reversa. As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente,
- A)F – V – F.
Errada, porque a primeira e a terceira afirmativas não podem ser consideradas falsas ao mesmo tempo.
- B)F – V – V.
Errada, porque a primeira afirmativa é verdadeira e a terceira é falsa.
- C)V – F – F.
Errada, porque a primeira e a segunda afirmativas são verdadeiras, não o contrário.
- D)V – V – F.
Certa, pois a primeira e a segunda afirmativas são verdadeiras e a terceira é falsa.
- E)V – V – V.
Errada, porque a terceira afirmativa está incorreta ao tratar o HBV como se fosse vírus de RNA.
Gabarito: D
A PCR é uma técnica muito usada na biologia molecular porque detecta diretamente o material genético do agente infeccioso. Isso ajuda bastante no diagnóstico de vírus, principalmente quando o exame sorológico ainda pode estar negativo por causa da janela imunológica. Em outras palavras: o vírus pode já estar lá, mas o anticorpo ainda não apareceu em quantidade detectável. Na primeira afirmativa, o raciocínio está correto: a PCR em tempo real triplex para HIV, HCV e HBV complementa a sorologia e reduz o risco de falso negativo nessa fase inicial da infecção. É uma estratégia muito útil em triagem e confirmação, especialmente quando se quer agilidade e maior sensibilidade. A segunda afirmativa também é verdadeira. A PCR em tempo real permite tanto quantificação relativa quanto absoluta, sendo muito aplicada na avaliação de carga viral. Na prática, isso é importante para acompanhar evolução clínica, resposta ao tratamento e controle da replicação viral. A terceira afirmativa é falsa porque o HBV não é vírus de RNA, e sim de DNA. Quem precisa da etapa de transcriptase reversa para gerar cDNA são os vírus de RNA, como o HIV em seu ciclo replicativo ou, no contexto laboratorial, os alvos de RT-PCR. Por isso, o gabarito correto é D: V - V - F.