O método de Gram é uma das mais importantes técnicas de coloração na microbiologia médica. Nessa técnica,
- A)a safranina, um corante básico, determina a coloração rosa de bactérias gram-negativas.
Certa: a safranina é a contracoloração que deixa as bactérias gram-negativas rosadas.
- B)o iodo, um corante ácido, é usado para corar de vermelho as bactérias gram-positivas.
Errada: o iodo não é corante ácido nem colore de vermelho; ele atua como mordente.
- C)o cristal violeta, um corante ácido, é responsável pela coloração púrpura das bactérias gram-negativas.
Errada: o cristal violeta não é ácido, e ele cora as gram-positivas, não as gram-negativas.
- D)a solução álcool-acetona, um corante ácido, cora as bactérias gram-positivas de púrpura.
Errada: a solução álcool-acetona não é corante e sua função é descolorir, não tingir de púrpura.
- E)a eosina, um corante básico, cora as bactérias gram-positivas de roxo; as bactérias gram-negativas permanecem incolores.
Errada: eosina não é o corante usado na técnica de Gram e a descrição da coloração está invertida.
Gabarito: A
O método de Gram separa as bactérias em dois grandes grupos com base na estrutura da parede celular. As gram-positivas têm camada espessa de peptidoglicano e retêm o cristal violeta, ficando roxas. As gram-negativas têm parede mais fina e membrana externa, perdem o violeta na etapa de descoloração e depois recebem a contracoloração, ficando rosadas. A sequência clássica é: cristal violeta, iodo, álcool-acetona e, por fim, safranina. O iodo funciona como mordente, ajudando a fixar o complexo cristal violeta-iodo dentro da célula. Já o álcool-acetona é o passo que descolore principalmente as gram-negativas, então ele não "tinge de roxo" ninguém, ele faz o contrário: remove a cor de quem não a segura bem. O gabarito é a letra A porque a safranina é justamente o corante de contraste usado no final para corar as bactérias gram-negativas de rosa. As gram-positivas continuam roxas, porque já estão bem "segurando" o cristal violeta. É uma técnica clássica de laboratório, daquelas que parecem simples, mas derrubam muita gente por causa do papel de cada reagente. Então, a lógica é essa: violeta entra, iodo fixa, álcool-acetona diferencia, safranina completa a visualização das que perderam a cor. Se você lembrar dessa ordem, já ganha metade da questão.