A RDC ANVISA nº 48 de 16 de março de 2004, teve como objetivo atualizar a normatização do registro de medicamento fitoterápicos no Brasil. Este registro só pode ser solicitado para medicamentos cujo princípio ativo é exclusivamente derivado de drogas vegetais. Como as plantas são entidades muito complexas, onde podem ter centenas de metabólitos secundários, a sua identificação e análise requer sistemas modernos de identificação dessas classes químicas. Sobre as técnicas de identificação mais utilizadas para produtos naturais, analise as afirmativas a seguir. I. CLAE – DAD (cromatografia líquida de alta eficiência acoplado com arranjo de fotodiodo. II. CLAE – EM (cromatografia líquida de alta eficiência acoplada com espectrometria de massa). III. CLAE – TG (cromatografia líquida de alta eficiência acoplada com termogravimetria). Está correto o que se afirma em
- A)I, somente.
Esta alternativa sustenta que apenas a afirmativa I está correta, isto é, que a CLAE acoplada ao detector de arranjo de fotodiodos (DAD) é usada na identificação de produtos naturais. Isso procede, porque o DAD registra espectros UV-Vis ao longo de vários comprimentos de onda e ajuda a caracterizar metabólitos como flavonoides, fenólicos e alcaloides. O problema é que a afirmativa II também descreve uma técnica consagrada, então a proposição fica incompleta.
- B)I e III, somente.
Aqui se afirma que as afirmativas I e III estariam corretas. A I é verdadeira, pois a CLAE-DAD é uma ferramenta muito utilizada para perfilamento e identificação de compostos de origem vegetal; porém a III não corresponde a uma técnica de identificação química rotineira em produtos naturais, já que a termogravimetria mede perda de massa por aquecimento e não fornece, como regra, a caracterização estrutural de metabólitos separadas por cromatografia. Por isso, a combinação proposta não se sustenta.
- C)III, somente.
Esta opção diz que somente a afirmativa III estaria certa, ou seja, que a CLAE acoplada à termogravimetria seria uma técnica usada para identificar produtos naturais. Ocorre que a termogravimetria não é um acoplamento típico da cromatografia líquida para análise de metabólitos secundários, pois serve sobretudo para estudar estabilidade térmica e composição em função da temperatura. Além disso, as afirmativas I e II descrevem técnicas efetivamente empregadas nessa área, então a alternativa erra tanto por incluir a III quanto por excluir as verdadeiras.
- D)I e II, somente.
A alternativa reúne as afirmativas I e II, que correspondem às técnicas clássicas de identificação em produtos naturais. A CLAE-DAD é usada para comparar perfis cromatográficos e espectros UV-Vis, enquanto a CLAE-EM acrescenta informação de massa e fragmentação, tornando a identificação muito mais robusta em matrizes vegetais complexas. A III fica de fora porque termogravimetria não é uma técnica padrão de acoplamento para esse fim.
- E)II e III, somente.
Aqui se afirma que as corretas seriam II e III. A afirmativa II realmente descreve uma técnica consagrada, já que a CLAE-EM é amplamente empregada na elucidação e na triagem de metabólitos de plantas. O erro está em incluir a III, porque termogravimetria não é, em regra, uma técnica de identificação de compostos em cromatografia líquida, e também em deixar de fora a I, que é igualmente válida.
Gabarito: D
Quando se fala em identificação de produtos naturais, especialmente fitoterápicos, a análise precisa ser capaz de separar, detectar e ajudar a reconhecer vários componentes da mistura vegetal. Por isso, técnicas de cromatografia acopladas a detectores modernos são as mais usadas, porque lidam bem com matrizes complexas e perfis químicos ricos em metabólitos secundários. A RDC ANVISA nº 48/2004 trata do registro de medicamentos fitoterápicos e reforça a necessidade de controle de qualidade e identificação adequada da matéria-prima vegetal. A afirmativa I está correta: CLAE-DAD, ou cromatografia líquida de alta eficiência com arranjo de fotodiodos, é uma técnica muito usada para obter perfis cromatográficos e comparar comprimentos de onda de absorção, ajudando na identificação de compostos naturais. A afirmativa II também está correta: CLAE-EM, isto é, cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa, é uma das ferramentas mais importantes hoje para identificar substâncias em produtos naturais, porque oferece alta sensibilidade e informação estrutural. Já a afirmativa III está errada. Termogravimetria não é uma técnica de acoplamento clássica para identificação de constituintes em cromatografia líquida de produtos naturais. Ela é usada para avaliar variação de massa com a temperatura, sendo mais ligada à análise térmica do que à identificação cromatográfica de metabólitos. Por isso, o gabarito D está correto: I e II, somente.