Na microbiologia, para a realização de um exame bacteriológico, podem ser utilizados diversos métodos, tais como tinta nanquim, Ziehl-Neelsen, Albert-Laybourn, no entanto, a coloração de Gram ainda é a mais amplamente disponível e utilizada. Sobre essa técnica na preparação de um esfregaço em lâmina de vidro para microscopia, a amostra será mantida em ar ambiente para sua secagem e fixada por metanol ou por meio de um leve aquecimento. Posteriormente, um corante (cristal violeta) será adicionado, por um a dois minutos, e, em seguida, inserido o lugol, também por um a dois minutos. Dessa reação forma-se o complexo iodo-pararrosalina na parede celular das bactérias, que se coram de roxo, tanto as bactérias Gram-positivas quanto as Gram-negativas. Em seguida, após a lavagem da lâmina, acrescenta-se uma solução de álcool-éter ou de álcool-acetona ao material. Qual será o resultado das lâminas que apresentam as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas? Marque a alternativa CORRETA:
- A)A bactéria Gram-positiva ficará incolor, e a Gram-negativa permanecerá roxa.
Errada, porque a Gram-positiva não perde o cristal violeta nessa etapa, e a Gram-negativa é que fica incolor após a descoloração.
- B)A bactéria Gram-positiva permanecerá roxa, e a Gram-negativa ficará incolor.
Correta, pois a Gram-positiva retém o complexo cristal violeta-lugol e continua roxa, enquanto a Gram-negativa perde o corante e fica incolor.
- C)Ambas ficarão rosas.
Errada, porque a coloração rosa só aparece depois da contra-coloração, não nesta etapa da técnica.
- D)Ambas ficarão incolores.
Errada, porque a Gram-positiva não fica incolor após a descoloração, ela mantém a coloração roxa.
- E)Ambas continuarão roxas.
Errada, porque a Gram-negativa não continua roxa após o álcool, já que ela perde o corante nessa fase.
Gabarito: B
Depois, normalmente entra o corante de contraste, como safranina, para que as Gram-negativas apareçam coradas em rosa ou vermelho. Mas atenção: a questão para exatamente antes dessa etapa final e quer saber o efeito da descoloração. Por isso, o gabarito B está correto: Gram-positivas permanecem roxas e Gram-negativas ficam incolores.