A lei de Lambert-Beer afirma que a absorbância é proporcional à concentração da espécie química absorvente, sendo constantes o comprimento de onda e a espessura atravessada pelo feixe luminoso. Essa lei é fundamental em qual das seguintes metodologias?
- A)Eletroforese.
Errada, porque eletroforese separa moléculas por tamanho e carga em um campo elétrico, não pela absorbância da luz.
- B)Espectofotometria.
Certa, porque a espectrofotometria mede a absorbância e se fundamenta diretamente na lei de Lambert-Beer.
- C)ELISA.
Errada, porque o ELISA usa reação antígeno-anticorpo com leitura por cor, mas a questão pede a metodologia diretamente ligada à lei de Lambert-Beer.
- D)Western Blot.
Errada, porque Western blot identifica proteínas por anticorpos após separação eletroforética, não pela relação absorbância-concentração.
- E)Cromatografia.
Errada, porque cromatografia separa componentes por interação com fases móvel e estacionária, não por absorbância segundo Lambert-Beer.
Gabarito: B
O gabarito é a alternativa B porque a espectrofotometria usa exatamente a absorvância da luz para quantificar substâncias. Em provas, a banca gosta de trocar esse conceito por técnicas que também usam leitura óptica ou reação com cor, mas não têm como base direta essa lei. Então, se apareceu Lambert-Beer, pense em medida de absorbância em espectrofotômetro.