A hematoxilina é um corante natural com baixo potencial de afinidade tecidual. Para empenhar a função de corante, é necessário que ela seja oxidada e convertida em hemateína. Acerca do tema, avalie as afirmativas a seguir. I. Os tecidos corados com hematoxilina e eosina apresentam o núcleo corado pela eosina e citoplasma pela hematoxilina. II. A hematoxilina e a eosina não são caracterizadas como uma coloração combinada, pois atuam como corantes em localizações diferentes do tecido. III. O processo de coloração do tecido pela hematoxilina e pela eosina é realizado em momentos diferentes. Está correto o que se afirma em
- A)I, apenas.
A alternativa diz que apenas a afirmativa I estaria correta, mas a I inverte os corantes da técnica H&E: na prática, a hematoxilina, após oxidação a hemateína e associação a um mordente, cora principalmente os núcleos, enquanto a eosina cora citoplasma e matriz extracelular. Como o núcleo não é corado pela eosina nem o citoplasma pela hematoxilina, essa opção não se sustenta.
- B)II e III, apenas.
A alternativa sustenta que as afirmativas II e III seriam corretas. O problema é que a II erra o conceito de coloração combinada: hematoxilina e eosina formam justamente uma técnica clássica e complementar, ainda que cada corante tenha afinidade por estruturas distintas do tecido. A III está correta ao indicar que a coloração é feita em etapas sucessivas, mas a presença da II torna a alternativa incorreta.
- C)I e III, apenas.
A alternativa afirma que as afirmativas I e III estariam corretas. A III realmente está certa, porque a coloração por hematoxilina e eosina é sequencial, com aplicação em momentos diferentes. Contudo, a I está errada ao trocar as afinidades dos corantes, atribuindo a eosina ao núcleo e a hematoxilina ao citoplasma, o que contraria a histologia básica.
- D)III, apenas.
A alternativa diz que somente a afirmativa III está correta, e é isso que acontece na técnica de hematoxilina e eosina. A coloração é realizada em etapas, normalmente primeiro com hematoxilina e depois com eosina, porque cada corante evidencia componentes teciduais diferentes. As afirmativas I e II falham, respectivamente, por inverterem a distribuição dos corantes e por negar indevidamente que H&E seja uma coloração combinada.
- E)I e II, apenas.
A alternativa sustenta que as afirmativas I e II estariam corretas. Isso não procede porque a I troca as estruturas coradas por cada corante, contrariando o padrão da técnica, e a II nega o caráter combinado da coloração H&E, que é justamente um método clássico de contraste entre núcleo e citoplasma. Como ambas estão conceitualmente equivocadas, essa opção não pode ser a resposta.
Gabarito: D
A coloração por hematoxilina e eosina, a famosa H&E, é um clássico da histologia e do laboratório: a hematoxilina, depois de oxidada e convertida em hemateína, tem afinidade por estruturas ácidas, principalmente o núcleo, que fica azulado/arroxeado. Já a eosina é um corante ácido que se liga a componentes básicos, como o citoplasma, deixando tudo em tom rosado. Ou seja, a lógica é quase o oposto do que a afirmativa I descreve, então ela está errada. A afirmativa III está correta porque a coloração ocorre em etapas diferentes: primeiro vem a hematoxilina, depois há lavagem/diferenciação e, por fim, a eosina. É um processo sequencial, e não um banho único em que tudo pega cor ao mesmo tempo. Por isso, em rotina histológica, essa dupla é chamada de coloração combinada, justamente porque os corantes atuam de forma complementar no mesmo preparo. A afirmativa II também está errada, porque hematoxilina e eosina são, sim, uma coloração combinada. O fato de cada uma marcar regiões diferentes do tecido não impede isso; pelo contrário, essa é a graça do método. Em provas, a banca gosta de inverter núcleo com citoplasma e confundir a ideia de combinação com “mesmo local de ação”. Resumo para levar para a prova: hematoxilina cora núcleo, eosina cora citoplasma, e a aplicação acontece em fases diferentes. Por isso, somente a afirmativa III está correta.